Du 08/1953 au 08/1956.

Les améliorations constantes apportées au modèle original ont conduit à la série 401, produite de 1953 à 1956.

Cette série de modèles a également introduit la désignation numérique 400, qui est utilisée à ce jour pour toutes les séries de modèles Unimog. Les désignations de variantes de modèles ont été introduites en même temps, permettant une identification exacte des véhicules. Les six premiers chiffres (série / variante du modèle) marquent également le début du numéro de châssis.

10 928 unités dans 5 variantes de modèle ont été produites. La série 402 a été introduite en même temps que la série 401, avec un empattement plus long de 400 mm. La série 401 est la première série à porter l'étoile Mercedes à titre de marque, remplaçant le symbole oxhead en septembre 1955 après une période d'utilisation parallèle.